QIACUBE, QIAGEN firmasının ayrıntılı ve temiz şekilde DNA izolasyonu yapması için ürettiği bir cihazdır. DNA izolasyonlarında sıkça kullanılmaktadır. Cihazda süzgeç bulunduğundan izole edilen DNA ile alınan yabancı madde miktarı yok denecek kadar azdır. Bu sebepten, DNA dizilemesi gibi önemli deneylerde oldukça kolaylık sağlamaktadır. Üstelik DNA’yı 1 saat gibi bir sürede izole edebiliyor. DNA izolasyonunun dışında RNA ve virüs izolasyonu için de kullanılabiliyor. Cihazın kendine özel solisyonları ve adaptörleri bulunuyor. AW1 ve AW2 diye adlandırdığımız bufferlara %100 etanol karışıtırılıyor. Bu karışımın miktarı yine bu kutuların üzerinde yazıyor ve AW1 için ayrı AW2 için ayrı miktarda etanol ekleniyor. AL buffer, hücreyi ve çekirdeği parçalayacak enzimleri içeriyor. AE buffer ise elution içeriyor ve filtreden DNA’yı akıtıp tüpe dolmasını sağlıyor.
Cihazın Çalışma Prensibi
DNA örnekleri pipet ile çekilip, adaptördeki süzgecin bulunduğu parçalama ve yıkama tüpüne koyuluyor. Burada proteinaz k ve liziz buffer yani AL ile hücreler ve çekirdek zarı parçalanıyor. Burada oluşan kopmleks wash bufferlarla yani AW1 ve AW2 ile yıkanıyor. Ancak burada filtre bulunduğundan, DNA akamayıp filtrede kalıyor. Sonra cihaz filtreyi alıp ayrı bir tüpe koyuyor. Ardından elution yani AE buffer ile DNA filtreden akıtılıp tüpe geçmesi sağlanıyor.
Cihazın Çalışma Aşamaları
1. Lyses
2. İncubate
3. Bind
4. Wash
5. Elute